Controle de Contaminação em Laboratórios Médicos

Em um laboratório médico, o risco de contaminação das culturas celulares é incalculável – por mais minucioso que seja o trabalho. Certamente não é inédito que os riscos sejam mal calculados, e a contaminação muitas vezes resulta na perda da cultura. Portanto, neste blog, gostaríamos de esclarecer como detectar sistematicamente e evitar a contaminação em linhagens celulares.

Todo laboratório médico está sob ameaça dia após dia
A contaminação microbiana em culturas de células, inclusive aquelas adquiridas de terceiros, não é incomum em laboratórios. Na verdade, o oposto é verdadeiro: muitas linhagens de células cultivadas em laboratório estão infectadas com micoplasma. Minúsculos esporos de fungos são onipresentes e podem se espalhar pelo ar. Obviamente, ao trabalhar em um ambiente estéril, há espaço para erro humano. É fácil cometer um erro.

Cenários de terror em laboratórios de cultura de células - contaminação de todos os tipos:
Contaminação microbiana (bactérias, micoplasma, fungos, leveduras, etc.) Contaminação por
vírus Contaminação
por proteínas (príons)
Contaminação química (lixiviáveis ​​e extraíveis de plásticos, metais pesados, etc.
) contaminação com outras culturas de células
De onde vem a poluição?
1. Quão "limpa" é a cultura original?

Os problemas geralmente começam com o material de origem. Mesmo com todos os esforços possíveis na produção de mídia, alguns materiais não podem ser totalmente estéreis. Portanto, há sempre o risco de o micoplasma escapar do filtro estéril. Os príons podem até sobreviver à esterilização a vapor a 121 °C.

2. O laboratório de trabalho é realmente um ambiente estéril?

Uma das principais causas de contaminação laboratorial é o corpo humano. Por exemplo, muitos casos de contaminação cruzada poderiam ser evitados se os técnicos de laboratório evitassem manusear várias linhas de produção ao mesmo tempo na bancada estéril. Uma cultura pode infectar rapidamente outra se o líquido não for manuseado adequadamente.

Além disso, apressar as coisas é o pior inimigo do trabalho monótono. A porta da incubadora do laboratório não deve ser aberta sem motivo e, claro, não deve ser deixada aberta por muito tempo. Não importa quanta pressão de tempo eles possam estar, os técnicos de laboratório devem trabalhar apenas em uma linha de células por vez. Ao desembalar pipetas descartáveis ​​sob a bancada, a tampa deve ser retirada após desaparafusar.

3. Você está usando o equipamento de laboratório correto?

Claro, até mesmo equipamentos usados ​​em laboratórios médicos são perfeitamente possíveis de causar contaminação em cultura de células. Portanto, recomendamos:

Use recipientes de plástico sem plastificantes
Escolha um local adequado para a incubadora (local próximo ao lavatório pode levar à contaminação do sabão)
Use acessórios de incubadora feitos de cobre esterilizado
Quando antibióticos são usados, linhas sem antibióticos devem ser criadas de vez em quando. (Isso ocorre porque os antibióticos podem mascarar a contaminação e a infecção pode se espalhar.)
Que métodos investigativos podem ser usados ​​para rastrear quais infecções?
Uma das coisas mais perigosas sobre as infecções por micoplasma é que muitas vezes elas passam despercebidas por muito tempo. Em princípio, os eventos de poluição podem ser controlados e rastreados por uma variedade de métodos, alguns muito sofisticados e outros nem tanto.

Um técnico de laboratório experiente pode dizer se ocorreu contaminação cruzada simplesmente olhando ao microscópio.
Se extrairmos todo o DNA de uma cultura de células, o método de PCR pode ser usado para detectar seu conteúdo de DNA de micoplasma.
Os laboratórios que realizam transdução viral ou bioensaios também devem verificar se há contaminação viral.
Os laboratórios que fabricam medicamentos para novas terapêuticas devem verificar se há baixo risco de bactérias, esporos, fungos, micoplasma, HIV, HCV e BSE.

Como lidar com a poluição?
Cada caso de contaminação deve ser documentado e classificado. No mínimo, os laboratórios médicos que mantêm os problemas de poluição em segredo estão colocando em risco sua boa reputação.

Obviamente, medidas especiais de limpeza também devem ser tomadas em caso de contaminação: no caso de infecções fúngicas, é aconselhável verificar se o laboratório é desinfetado regularmente com um agente à base de álcool
. o interior da incubadora científica com uma solução à base de álcool ajuda a evitar a contaminação
A esterilização mensal com ar quente é prática médica padrão em muitos laboratórios
Para células-tronco sensíveis, apenas em casos raros linhas de células infectadas podem ser tratadas com antibióticos. Na maioria dos casos, a solução é cara - a cultura deve ser descartada e o trabalho deve ser iniciado do zero
na conclusão:
Ser capaz de detectar, validar e lidar consistentemente com a contaminação é absolutamente essencial, especialmente em laboratórios médicos que trabalham com células-tronco altamente sensíveis e não usam antibióticos. Monitoramento transparente é essencial. Encobrir a contaminação ou permitir que ela se espalhe apenas aumenta o perigo e é desnecessário. A Incubadora de Temperatura Constante deve ser sempre o componente mais seguro de toda a etapa do processo; se uma amostra estiver contaminada, na maioria dos casos isso ocorre a montante ou a jusante do cultivo da incubadora de resfriamento .