Como controlar a contaminação do laboratório médico

Em um laboratório médico, o risco de contaminação de culturas de células é imensurável – não importa quão cuidadoso seja o trabalho. O erro de cálculo do risco certamente não é inédito, e a contaminação muitas vezes resulta em perda cultural. Portanto, neste blog, queremos esclarecer como detectar e evitar sistematicamente a contaminação em linhagens celulares.

Todos os laboratórios médicos estão sob ameaça dia após dia
A contaminação microbiana em culturas de células – incluindo aquelas adquiridas de terceiros – não é incomum em laboratórios. Na verdade, o oposto é verdadeiro: muitas linhagens de células cultivadas em laboratório estão infectadas com micoplasma. Pequenos esporos de fungos se escondem em todos os lugares e podem ser transportados pelo ar. Claro, ao trabalhar em um ambiente estéril, há espaço para erro humano. É fácil cometer erros.

Cenários de horror em laboratórios de cultura de células - vários tipos de contaminação: Contaminação microbiana (
bactérias, micoplasma, fungos, leveduras, etc. ) contaminação com outras culturas de células De onde vem a poluição? 1. Quão "limpa" era a cultura primitiva? Os problemas geralmente começam com o material original. Mesmo com os melhores esforços na produção de meios, alguns materiais não podem ser completamente estéreis. Portanto, há sempre o risco de o micoplasma escorrer pelo filtro estéril. Os príons podem até sobreviver à esterilização a vapor a 121°C.









2. O laboratório de trabalho é realmente um ambiente estéril?

Uma das principais causas de contaminação laboratorial é o corpo humano. Por exemplo, muita contaminação cruzada pode ser evitada se os técnicos de laboratório evitarem trabalhar em várias linhas de produção ao mesmo tempo em uma bancada estéril. Uma cultura pode infectar outra rapidamente se o fluido não for manuseado adequadamente.

Além disso, a pressa é o pior inimigo do trabalho estéril. A porta da incubadora de CO2 não deve ser deixada aberta sem motivo, certamente não por longos períodos de tempo. Os técnicos de laboratório devem trabalhar apenas em uma linha de células por vez, não importa quanta pressão de tempo estejam sob. Ao desembalar as pipetas de uso único sob a bancada, uma vez que a tampa é desaparafusada, a tampa deve ser colocada de lado - palavra-chave: Boas Práticas de Laboratório (BPL).
Para obter mais informações, leia nossa postagem no blog: "Cinco aplicativos interessantes para incubadoras de CO2".

3. Você está usando o equipamento de laboratório correto?

Claro, é perfeitamente possível que mesmo o equipamento usado em laboratórios médicos possa levar à contaminação de culturas de células. Portanto, recomendamos:

Use recipientes de plástico sem plastificantes
Escolha o local correto da incubadora de mofo (localizações próximas ao lavatório podem levar à contaminação do sabão)
Use acessórios da incubadora feitos de cobre biocida
Quando antibióticos são usados, cepas sem antibióticos devem ser cultivadas de tempos em tempos . (Isso ocorre porque os antibióticos mascaram a contaminação e a infecção pode se espalhar.)
Quais métodos de investigação podem ser usados ​​para rastrear quais infecções?
A coisa mais perigosa sobre as infecções por micoplasma é que elas geralmente passam despercebidas por longos períodos de tempo. Em princípio, os eventos de contaminação podem ser controlados e rastreados de várias maneiras, algumas das quais são muito complexas e outras menos.

Técnicos de laboratório experientes podem dizer se a contaminação cruzada ocorreu simplesmente olhando através de um microscópio.
Se extrairmos todo o DNA da cultura de células, seu conteúdo de DNA de micoplasma pode ser detectado usando métodos de PCR.
Os laboratórios que realizam transdução viral ou bioensaios também devem verificar a contaminação viral.
Os laboratórios que fabricam medicamentos para novos tratamentos devem verificar a presença de bactérias, esporos, fungos, micoplasma, HIV, HCV e BSE de baixo risco.
Como lidar com a poluição?
Cada ocorrência de contaminação deve ser registrada e classificada. Se nada mais, laboratórios médicos que escondem seus problemas de contaminação debaixo do tapete estão colocando sua boa reputação em risco.

Obviamente, em caso de contaminação, medidas especiais de limpeza também devem ser tomadas: no caso de infecções fúngicas, é aconselhável verificar se o laboratório é regularmente desinfetado com reagentes à base de álcool
. a desinfecção do interior da incubadora com reagentes à base de álcool ajudará a evitar a contaminação
A desinfecção mensal com ar quente é prática médica padrão em muitos laboratórios
. No caso de células-tronco sensíveis, as linhagens de células infectadas só podem ser tratadas com antibióticos em casos raros. Na maioria dos casos, a solução é cara - a cultura tem que ser descartada e o trabalho tem que começar do zero.

Para concluir:
Ser capaz de detectar, verificar e lidar com a contaminação de forma consistente é uma necessidade absoluta, especialmente em laboratórios médicos que usam células-tronco altamente sensíveis e não usam antibióticos. O monitoramento transparente é fundamental. Encobrir a contaminação ou deixá-la se espalhar só aumenta o perigo e é desnecessário. A incubadora deve ser sempre o componente mais seguro em todas as etapas do processo; se uma amostra estiver contaminada, na maioria dos casos isso ocorre a montante ou a jusante da cultura da incubadora.

De acordo com as diferentes faixas de controle de temperatura, as incubadoras de laboratório são aplicadas em diferentes campos. Câmara tem incubadora bioquímica, amplamente utilizada para departamentos de pesquisa e produção, como proteção ambiental, saneamento e prevenção de epidemias, agricultura, pecuária e produtos aquáticos, testes de drogas, cultura de células, etc.